近日，浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院聯(lián)合杰毅生物共同開展了關于中耳膽脂瘤的發(fā)病機制研究。并首次應用 mNGS 探究了病原微生物與中耳膽脂瘤之間的聯(lián)系，研究成果于 2021 年 11 月 5 日發(fā)表在《Frontiers in Microbiology》（IF 5.64）雜志上。浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院耳鼻咽喉科蔣驊主任為本文第一作者，浙大醫(yī)學院轉化學院陳祥軍教授為本文通訊作者，杰毅生物王珺博士、韓序博士和丁文超博士共同參與此研究。

1. 研究背景

中耳膽脂瘤通常是中耳炎和咽鼓管功能障礙的結果，患者一般表現(xiàn)為慢性耳漏和進行性地傳導性聽力喪失。據(jù)報道，病原微生物感染與中耳膽脂瘤的發(fā)生密切相關，最常見的有銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌。然而，傳統(tǒng)的病原學檢測技術在中耳膽脂瘤中的病原微生物檢出率通常很低，導致臨床難以及時有效地獲得有用信息。病原宏基因組測序 (mNGS) 作為一種新型的病原學分子診斷技術，可提供更高的靈敏度和通量，并可同時檢測細菌、真菌、病毒、寄生蟲等多種病原微生物，為臨床病原學診斷提供更多依據(jù)。但目前尚未有關于 mNGS 在中耳膽脂瘤中的研究應用，故本研究利用 mNGS 來探究病原微生物感染與中耳膽脂瘤發(fā)病機制的關系。

2. 材料與方法

本研究選取了來自浙江大學附屬第二醫(yī)院耳鼻咽喉科的 16 例中耳膽脂瘤患者的組織標本（手術過程中采集），并同時對其進行傳統(tǒng)病原學檢測和 Q-mNGS 檢測。所有患者均行術前顳骨 CT 掃描，記錄骨侵蝕 CT 評分 (表 1)。

表 1? 顳骨 CT 掃描評分

3. 研究結果

納入研究的 16 例中耳膽脂瘤患者均表現(xiàn)為耳漏和聽力喪失，其中 7 例患者表現(xiàn)為嚴重的顳骨侵蝕，具體臨床特征見表 2。

表 2 中耳膽脂瘤患者臨床特征

傳統(tǒng)病原學檢測結果顯示，11 例為陰性，5 例為陽性，其中 1 例屬于真菌感染，4 例屬于細菌感染，且 75%（3/4）為葡萄球菌屬感染。Q-mNGS 檢測結果顯示，病原微生物檢測陽性率為 100%（16/16）。其中，最常見的病原微生物屬為曲霉屬 (11/16,68.75%)，序列數(shù)（1～2882）與相對豐度（0.01% ~ 90.34%）均存在較大差異；其次為葡萄球菌屬 (7/16,43.75%)（表 3）。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，曲霉屬的相對豐度在患者組之間存在顯著差異，CT 評分高的患者曲霉屬相對豐度明顯高于 CT 評分低的患者 (p = 0.023)(表 4 和圖 1)。

表 3? 16 例患者的傳統(tǒng)病原學檢測結果和 Q-mNGS 檢測結果

表 4 不同顳骨 CT 評分患者的曲霉屬相對豐度

圖 1 不同顳骨 CT 評分患者的曲霉屬相對豐度

4. 研究結論

本研究結果顯示，Q-mNGS 在中耳膽脂瘤患者的病原體檢出率高達 100%，顯著高于傳統(tǒng)病原學檢出率，表明 mNGS 有助于提高中耳膽脂瘤病原體檢出。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，Q-mNGS 檢出與膽脂瘤特異性相關的最常見微生物為曲霉屬（12/16，75%），且其存在明顯與骨侵蝕程度有關，而傳統(tǒng)病原學檢測發(fā)現(xiàn)則以葡萄球菌屬為主，這也為微生物對中耳膽脂瘤的發(fā)病機制研究提供了新的思路。